潔凈室(區(qū))空氣中浮游菌的檢測。潔凈區(qū)浮游菌檢測是一種評估和控制潔凈區(qū)(如實驗室、生產車間等)內空氣質量的方法。這種檢測的目的是通過測量空氣中的微生物(即浮游菌)數(shù)量，來評估潔凈區(qū)的清潔度或污染程度。下面蘇州三興凈化小駱帶大家詳細看下如何進行浮游菌采樣檢測。
01浮游菌的檢測，也需要動態(tài)和靜態(tài)都檢測嗎?
是的，靜態(tài)檢測可以幫助我們了解在無人活動、設備關閉或運行最小化的情況下，潔凈區(qū)的微生物污染程度。而動態(tài)檢測則可以幫助我們了解人員活動、設備運行等可能對潔凈區(qū)的微生物污染產生影響的因素。
我們在對潔凈區(qū)進行浮游菌檢測時這兩種狀態(tài)下的檢測都是必要的，因為它們可以從不同的角度反映出潔凈區(qū)的微生物污染情況。根據(jù)這兩種測試的結果，可以采取相應的措施來改善和控制潔凈區(qū)的微生物污染情況。
02檢測潔凈室(區(qū))浮游菌是否需要用到專業(yè)的儀器?具體的測試方法?
浮游菌的測試需要使用浮游菌采樣器收集空氣樣本，浮游菌采樣器一般采用撞擊法機理，可分為狹縫式采樣器、離心式或針孔式采樣器。通過不同機理將采集的空氣撞擊到專用的固形培養(yǎng)基表面，空氣內附著的活性微生物粒子將被接種在培養(yǎng)基上，在適當?shù)臏囟群蜁r間培養(yǎng)下，活性微生物粒子將形成清晰可見的菌落。計算可得浮游菌平均濃度，完成浮游菌測試。
《藥品生產質量管理規(guī)范(2010 年修訂)》附錄1-無菌藥品第十一條 應當對微生物進行動態(tài)監(jiān)測，評估無菌生產的微生物狀況。監(jiān)測方法有沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法和表面取樣法(如棉簽擦拭法和接觸碟法)等。動態(tài)取樣應當避免對潔凈區(qū)造成不良影響。成品批記錄的審核應當包括環(huán)境監(jiān)測的結果，對表面和操作人員的監(jiān)測，應當在關鍵操作完成后進行。在正常的生產操作監(jiān)測外，可在系統(tǒng)驗證、清潔或消毒等操作完成后增加微生物監(jiān)測。
03浮游菌測試要點
1.必須按照測試儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定。使用校驗合格，且在使用有效期內的儀器。
2.測試儀器在未進入被測區(qū)域時,若必需,則先清潔表面或在相應的潔凈室內準備和存放(用保護罩或其他適當?shù)赝庹直Ｗo儀器)。
3.在 100 級潔凈室內用紙時，上面應蒙上一張透明不沾塵的覆蓋物，在100 級潔凈室內不能用鉛筆和橡皮。
4.使用測試儀器時應嚴格按照儀器說明書操作。
4.1 儀器開機，預熱至穩(wěn)定后，方可按儀器說明書的規(guī)定對儀器進行校正，同時檢查采樣流量，并根據(jù)采樣量設定采樣時間。
4.2 采樣口必須用便于消毒及化學性能穩(wěn)定的材料制造。
4.3 采樣管嚴禁滲漏，內壁應光滑。
4.4 采樣管的長度應根據(jù)測點的高度定,盡量減少彎曲。
培養(yǎng)皿
一般采用中90 mmx15mm 規(guī)格的培養(yǎng)皿?？筛鶕?jù)所選用采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。離心式采樣器采用專用的固形培養(yǎng)條。
培養(yǎng)基
大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA)或沙氏培養(yǎng)基(SDA)或其他用戶認可并經驗證了的培養(yǎng)基。
恒溫培養(yǎng)箱
必須定期對恒溫培養(yǎng)箱進行校驗。
04測試步驟
測試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒。
1.采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于 100 級潔凈室的采樣器宜預先放在被測房間內。
2.用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
3.采樣前，先用消毒劑清洗采樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面采樣結束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。
4.采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內壁進行消毒時，應將管中的殘留液倒掉并晾干。
5.采樣者應穿戴與被測潔凈區(qū)域相應的工作服，在轉盤上放入或調換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒或戴無菌手套操作。
6.采樣儀器經消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開啟浮游菌采樣器使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時間不少于5min，并檢查流量并根據(jù)采樣量調整設定采樣時間。
7.關閉浮游菌采樣器，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子
8.置采樣口于采樣點后，開啟浮游菌采樣器進行采樣。
培養(yǎng)
全部采樣結束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。TSA:在 30℃~35 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于 2d; SDA:在20℃℃~25 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于 5d。每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。
菌落計數(shù)
用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計數(shù)、標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5~10 倍放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有 2 個或 2 個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。
注意事項
使用前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質、破損或污染的不能使用。對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。
05測試條件
在測試之前，要對潔凈室(區(qū))相關參數(shù)進行預先測試，這類測試將會提供測試懸浮粒子的環(huán)境條件，例如:這種預先測試或可包括:a)溫度和相對濕度的測試。潔凈室(區(qū))的溫度和相對濕度應與其生產及工藝要求相適應(無特殊要求時，溫度在 18 ℃℃~26 ℃℃，相對濕度在 45%~65% 為宜),同時應滿足測試儀器的使用范圍:b)室內送風量或風速的測試，或壓差的測試:c)高效過濾器的泄漏測試。
06測試狀態(tài)
a)靜態(tài)和動態(tài)兩種狀態(tài)均可進行測試。b)靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于 2 人。c)浮游菌測試前，被測潔凈室(區(qū))由用戶決定是否需要預先消毒。d)測試報告中應標明測試時所采用的狀態(tài)和室內測試人員數(shù)。
07測試時間
1.在空態(tài)或靜態(tài) a 測試時，對單向流潔凈室(區(qū))而言，測試宜在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于 10 min 后開始。對非單向流潔凈室(區(qū)),測試宜在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于30 min后開始。在靜態(tài) b 測試時，對單向流潔凈室(區(qū))，測試宜在生產操作人員撤離現(xiàn)場并經過 10 min 自凈后開始:對非單向流潔凈室(區(qū)),測試宜在生產操作人員撤離現(xiàn)場并經過20分鐘自凈后開始。
2.在動態(tài)測試時，則須記錄生產開始的時間以及測試時間。
07采樣點數(shù)量及其布置
最少采樣點數(shù)目: 浮游菌測試的最少采樣點數(shù)目可參照上篇小課堂《潔凈室(區(qū))懸浮粒子檢測方法及要點》(GB/T16292-2010)。
采樣點的位置: 浮游菌的采樣點位置可參照上篇小課堂《潔凈室(區(qū))懸浮粒子檢測方法及要點》( GB/T 16292-2010)。a)工作區(qū)測點位置離地 0.8m~1.5m 左右( 略高于工作面 ):b)送風口測點位置離開送風面 30 cm 左右:c)可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。
采樣次數(shù)每個采樣點一般采樣一次。
08記錄
測試報告應包含以下內容:a)測試者的名稱和地址，測試日期b)測試依據(jù);c)被測潔凈室(區(qū))的平面位置(必要時標注相鄰區(qū)域的平面位置 ):d)有關測試儀器及其測試方法的描述:包括測試環(huán)境條件,采樣點數(shù)目以及布置圖,測試次數(shù)，采樣流量或可能存在的測試方法的變更，測試儀器的檢定證書等:若為動態(tài)測試，則還應記錄現(xiàn)場操作人員數(shù)量及位置，現(xiàn)場運轉設備和數(shù)量和位置;e)測試結果，包括所有統(tǒng)計計算資料。
09結果計算
用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)，每個測點的浮游菌平均濃度的計算:
浮游菌平均濃度(個/m)=菌落數(shù)/采樣量(1 m'=1 000 L)
10結果評定
1.每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選定評定標準中的界限。
2在靜態(tài)測試時，若某測點的浮游菌平均濃度超過評定標準，則應重新采樣兩次，兩次測試結果均合格才能判為符合。
